В настоящее время лептоспирозы занимают одно из ведущих мест среди зоонозов по тяжести клинического течения, вероятности летальных исходов и количеству осложнений после перенесенного заболевания. Ежегодно в мире, по данным ВОЗ, более 500 000 человек заражаются инфекциями, вызванными возбудителями этой группы [1]. Источниками заражения являются дикие и сельскохозяйственные животные, которые выделяют возбудителей в окружающую среду, контаминируя воду открытых водоемов, почву, пищевые продукты и т. д. Основным путем передачи инфекции человеку является водный, меньшее значение имеют контактный и пищевой [2, 3].
Одним из самых неблагополучных по лептоспирозу регионов является Африка. На территории многих африканских стран (Нигерия, Танзания, Уганда, Алжир и др.) отмечаются случаи заболевания этой инфекционной болезнью, и доказана циркуляция возбудителей в природе [1–8]. Также были зарегистрированы завозные случаи лептоспироза из Африки в другие страны мира [4, 6].
К сожалению, современные исследования распространения возбудителей лептоспирозов на Африканском континенте являются фрагментарными и неполными. Нестабильная политическая и экономическая ситуация во многих государствах, недостаточно развитая структура здравоохранения в регионе, отсутствие современной лабораторной базы приводят к образованию пробелов в изучении циркуляции бактерий рода Leptospira на территории Западной и Центральной Африки. Нет четких данных об уровне заболеваемости лептоспирозом, основных носителях, а также возможных путях распространения и передачи инфекции. Этому во многом способствует отсутствие осведомленности медицинского персонала в отношении этого зооноза. Вместе с тем острая форма лептоспироза клинически неотличима от таких лихорадочных заболеваний, как малярия или вирусные геморрагические лихорадки, и практически не рассматривается при проведении дифференциальной диагностики [4].
Гвинейская Республика, расположенная в Западной Африке, территориально разделена на 4 ландшафтно-географические зоны: Нижнюю, Среднюю, Верхнюю и Лесную Гвинеи. Население страны, по данным на конец 2018 г., составляет около 13,8 млн человек1.
Не вызывает сомнений, что проблема лептоспироза актуальна и для Гвинейской Республики. После окончания эпидемии болезни, вызванной вирусом Эбола, в ликвидации которой принимали участие многие международные организации и специалисты, уровень лабораторной диагностики в стране был значительно улучшен, но до сих пор сведения о распространении этой инфекционной болезни в Гвинее отсутствуют.
Одним из показателей циркуляции возбудителей на определенной территории является определение иммунной прослойки среди населения. Выявление антител к лептоспирам у жителей Гвинейской Республики позволит определить уровень распространения лептоспироза в конкретных регионах страны и разработать предложения по организации эпидемиологического надзора.
Целью проведенной работы было изучение уровня иммунной прослойки среди людей, проживающих в различных ландшафтно-географических зонах Гвинейской Республики, к возбудителям лептоспироза методом иммуноферментного анализа (ИФА).
Материалы и методы
Исследование проводили на базе лаборатории Российско-Гвинейского научно-исследовательского центра эпидемиологии и профилактики инфекционных болезней, расположенного в г. Киндия на территории Исследовательского института прикладной биологии (ИИПБ) (Гвинейская Республика). Диагностическую работу осуществляли российские специалисты [3] совместно с сотрудниками ИИПБ.
Образцы крови для исследования были собраны в период с мая 2015 г. по март 2018 г. от людей, проживающих на территории всех 4 ландшафтно-географических зон Гвинейской Республики. Кровь забирали в количестве 5 мл, использовали системы для забора крови по общепринятой методике из локтевой вены натощак. Для исключения вероятности выявления РНК вируса Эбола полученные образцы были исследованы методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) при помощи набора реагентов «АмплиСенс® EBOV Zaire-FL» (ООО «ИнтерЛабСервис», Россия). Во всех случаях результат был отрицательный. Сыворотки были исследованы также методом иммунохроматографического анализа (ИХА) для обнаружения антигенов малярийных плазмодиев с помощью наборов реагентов SD BIOLINE Malaria Ag P.f/Pan (Standard Diagnostics, Inc., Южная Корея). С целью снижения вероятности неспецифических реакций образцы, которые содержали антигены возбудителей малярии, в последующее исследование включены не были.
Для исследования было отобрано 1839 сывороток крови людей, проживающих во всех 4 ландшафтно-географических зонах Гвинеи. Объемы выборок из популяций населения каждой зоны составляли: для Нижней Гвинеи – 693 образца, для Средней Гвинеи – 461, для Верхней Гвинеи – 349 и для Лесной Гвинеи – 336. В исследовании приняли участие 904 (49,2%) женщины и 935 (50,8%) мужчин в возрасте от 0 до 90 лет. Сыворотки изучали в рабочем разведении 1:100.
Работу проводили методом ИФА c использованием иммуноферментной тест-системы для качественного и полуколичественного обнаружения IgG к возбудителям лептоспироза «Лептоспироз-ИФА-IgG» (ООО «Oмникс», Россия) в соответствии с инструкцией. Данный препарат позволяет выявить антитела ко всем патогенным сероварам лептоспир. Результаты реакции учитывали с помощью фотометра для планшетов производства фирмы Bio-Rad (США). Оптическую плотность измеряли с основным фильтром 450 нм.
При статистической обработке материала рассчитывали долю серопозитивных образцов в каждой выборке, 95% доверительные интервалы (ДИ) для долей иммунной прослойки по методу Уилсона. Наличие или отсутствие статистически значимых различий в уровнях серопревалентности населения, проживающего в разных ландшафтно-географических зонах, оценивали путем сопоставления 95% ДИ. Отсутствие трансгрессии (ДИ сравниваемых показателей не перекрываются) свидетельствовало о наличии статистически значимых различий в уровнях иммунной прослойки населения.
Результаты
При исследовании 1839 образцов сывороток крови антитела класса IgG к лептоспирам были выявлены в 90 (4,9% от общего количества) случаях, что свидетельствует о возможном контакте людей с возбудителем и не исключает риска заражения.
Результаты определения антител к возбудителям лептоспирозов в сыворотках крови жителей Гвинеи в различных ландшафтно-географических зонах представлены в таблице.
Для экстраполяции полученных выборочных оценок были рассчитаны ДИ. Их сравнение показало, что во всех случаях отмечается трансгрессия, свидетельствующая об отсутствии статистически значимых различий в уровнях серопревалентности населения, проживающего в различных ландшафтно-географических зонах Гвинейской Республики.
Положительные результаты были получены при исследовании материала от людей всех возрастных групп. Из 90 проб, содержащих специфические антитела, 43 (47,7%) были получены от женщин и 47 (52,3%) – от мужчин.
Заключение
Таким образом, впервые на территории Гвинейской Республики были выявлены антитела класса IgG к лептоспирам в сыворотках крови людей и определен уровень иммунной прослойки населения. Проведенное исследование позволило предположить циркуляцию возбудителей лептоспирозов во всех 4 ландшафтно-географических зонах страны.
Природно-климатические условия (разнообразие ландшафтов, большое количество водоемов, сезонность климата), широкое распространение скотоводства, отсутствие вакцинации против лептоспирозов могут быть предпосылками для активной циркуляции возбудителей инфекции и способствовать возникновению вспышек заболевания. В связи с этим актуальным остается определение роли лептоспирозов в общей структуре заболеваний, регистрируемых на территории Республики Гвинея, а также повышение уровня осведомленности медицинского персонала при проведении дифференциальной диагностики лихорадок.
Также необходимы проведение эпизоотологического мониторинга для определения видов животных-носителей лептоспир в разных ландшафтно-географических зонах Гвинейской Республики; изучение уровня иммунной прослойки к возбудителю у крупного и мелкого рогатого скота, а также мониторинг открытых водоемов как возможных источников заражения людей [1, 2, 4]. Полученные сведения дадут возможность определить природную очаговость лептоспироза и проводить своевременные профилактические (противоэпидемические) мероприятия.
* * *
Исследования проведены в соответствии с Распоряжением Правительства РФ от 22 декабря 2017 г. № 2904-р о российско-гвинейском научно-техническом сотрудничестве в области эпидемиологии, профилактики и мониторинга бактериальных и вирусных инфекций в Гвинейской Республике (2018–2020 гг.).
